百灵鸟以能歌善舞而文明于世，但是雌雄百灵之间也存在较大的差别。一般来说，雌百灵鸟就只能单声鸣叫，叫不出婉转动听的歌声。而且从外形上来看，雄百灵鸟显得漂亮、精神，羽毛的颜色比雌鸟艳丽有光泽。而我们可以根据百灵鸟形态、鸣叫声等细微的差别来准确的鉴别出它的性别。
雌鸟头小，无后脑勺，近嘴处窄；雄鸟头大，有后脑勺，近嘴处宽。雄鸟眼大有神，眼在嘴上边，两眼离嘴角较近；雌鸟眼小无神、发呆，眼和嘴在一条直线上，两眼离嘴角较远。
雄百灵鸟眼眉白，宽而长，眉清而秀，腿粗壮而长，嘴长而粗，啄食有力，每个翅膀的飞羽中有6-12枚白色羽毛，这几枚飞羽洁白而又有光泽。雄鸟的“黑颈圈”呈半圆形，羽毛光泽透亮。
雌百灵鸟眉粗短不秀，眉色不鲜明，有的眉中间有间断，腿细短不粗壮，嘴短而细，啄食比雄鸟软弱，每个翅膀的飞羽中的白色羽毛不足6枚，羽毛略显暗淡无光泽。“黑颈圈”长而无光泽、短而窄。
在辨认百灵鸟性别的时候除了对比观察之外，还应该用手触摸。因为，在你触摸鸟儿的时候，会明显感觉它们身体骨骼成长的区别。一般来说，把雏鸟攥在手里模一模，雄鸟骨质发硬，雌鸟则比较软绵绵的。此外，雄鸟头顶中央从前至后有隆起的一个高棱，而雌鸟则比较扁平。
如果你是一个非常有经验的鸟类饲养者，你可以通过百灵鸟的鸣叫声来判断它们的性别。简单的说，雄百灵鸟鸣叫声清脆明亮，声音悠扬婉转。而雌性百灵鸟的叫声则比较的单一，比雄鸟的声音略显得无力，暗淡，没有那种清脆透亮的感觉。
